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A549、HT-29、CAL-27、MDA-MB-231細胞培養(yǎng)技術(shù)分享
更新時間:2024-02-27   點擊次數(shù):535次

影響影子:IF:16.6
發(fā)表期刊:Nature Communications
Doi: 10.1038/s41467-022-28213-y

原文標題:Electron transfer-triggered imaging of EGFR signaling activity。
背景:生物過程中的能量轉(zhuǎn)移是通過電子和質(zhì)子的轉(zhuǎn)移來實現(xiàn)的,在腫瘤發(fā)展進程中,與正常細胞相比,腫瘤細胞實現(xiàn)了極其活躍的電子轉(zhuǎn)移,以支持其增殖、分化和遷移。如果能夠通過監(jiān)測與腫瘤增殖相關(guān)信號通路的電子轉(zhuǎn)移,則有可能在此基礎(chǔ)上進行治療干預(yù)。
方法:研究了用于電子轉(zhuǎn)移觸發(fā)成像的ETTE納米探針在腫瘤治療過程中的動態(tài)監(jiān)測。通過納米探針設(shè)計,免疫熒光,western蛋白印跡等方法探究了使用ETTEE納米探針作為顯像劑,在A549肺癌細胞中對EGFR信號通路活性進行成像的效果。通過免疫組化,小鼠活體成像等方法并利用肺癌小鼠模型評估了ETTE納米探針在腫瘤治療過程中對EGFR信號通路活性的動態(tài)監(jiān)測能力。

結(jié)果:我們設(shè)計的ETTE納米探針,通過使用二茂鐵-DNA聚合物鏈,在信號通路激活過程中將轉(zhuǎn)移的電子改變?yōu)楣庑盘?,可以在時間和空間尺度上進行活體成像。進一步在A549細胞中使用ETTE納米探針對EGFR信號通路進行成像驗證了EGFR激活水平較高的細胞可以產(chǎn)生更強的信號,即在細胞水平上,EGFR相關(guān)信號通路的激活可以通過ETTE納米成像探針實現(xiàn)可視化?;谀[瘤治療過程中EGFR活性下降我們進一步利用ETTE納米探針對腫瘤治療過程進行動態(tài)監(jiān)測,結(jié)果顯示治療組腫瘤部位有更弱的信號。

結(jié)論:綜上所述,我們的研究表明,ETTE納米探針可以在腫瘤治療過程中實現(xiàn)對EGFR信號通路活性的動態(tài)監(jiān)測,并有望在后續(xù)的治療決策和預(yù)后中發(fā)揮關(guān)鍵作用。


文章引用:

Cell Culture

A549 cells: A549 cells derived from two different sources, American Type Culture Collection (ATCC) and China Center for Type Culture Collection (CCTCC). The A549 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

 

HT-29 cells: HT-29 cells were derived from CCTCC. The HT-29 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

 

CAL-27 cells: CAL-27 cells were derived from CCTCC. The CAL-27 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA) and 1% penicillin/streptomycin (New Cell & Molecular Biotech, Co., Ltd).

 

MDA-MB-231 cells: MDA-MB-231 cells were derived from CCTCC. The MDA-MB-231 cells were maintained in DMEM high glucose (Gibco™, USA) with 10% fetal bovine serum (Zeta life, USA).

1.png



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文章培養(yǎng)細胞方法總結(jié)
A549、HT-29、CAL-27、MDA-MB-231細胞均使用ZETA life含有10%血清及1%青/鏈霉素的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),MDA-MB-231細胞使用含有10%血清的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)。上述細胞正常培養(yǎng)后,提取細胞蛋白,通過Western blot檢測EGFR表達水平。同時,培養(yǎng)的A549細胞移植到小鼠體內(nèi),并通過活體成像實時觀察腫瘤生長情況。結(jié)果表明,使用ZETA life胎牛血清培養(yǎng)的A549細胞移植后,能夠形成穩(wěn)定的小鼠腫瘤模型。備注:A549:人非小細胞肺癌細胞;HT-29 :人結(jié)腸癌細胞;CAL-27:人舌鱗癌細胞;MDA-MB-231:人乳腺癌細胞。

引用產(chǎn)品

胎牛血清fetal bovine serum (Zeta life, USA) ;

熱門產(chǎn)品
Z7010FBS-500,胎牛血清(澳洲血源);Z7181FBS-500,胎牛血清(烏拉圭血源);Z7186FBS-500,胎牛血清(法國血源);Z7185FBS-500,胎牛血清(巴西血源);Z7187FBS-500,胎牛血清(墨西哥血源);Z7180FBS-500,胎牛血清(超低內(nèi)毒素血清);AD600150,Advanced DNA RNA 細胞轉(zhuǎn)染試劑;AV500150,小動物活體轉(zhuǎn)染試劑Advanced DNA RNA;CE80100T,無血清細胞凍存液 Plus ZT10002-5ml,支原體去除試劑(MRA)
ZETA life FBS(胎牛血清)簡介:
  美國ZETA life公司成立于1989年,是國際無血清細胞培養(yǎng)基DMEM/F12主要完成人,有幾十年的胎牛血清、無血清細胞培養(yǎng)基、以及干細胞、免疫細胞及腫瘤細胞等多種不同類型哺乳動物細胞的無血清培養(yǎng)液生產(chǎn)經(jīng)驗;ZETA life也是目前世界胎牛血清、無血清培養(yǎng)基最大的OEM供應(yīng)商之一;每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫(yī)師檢驗證明及品質(zhì)測試報告;ZETA life胎牛血清在100級的無菌間采用全自動方式制造生產(chǎn),具有良好的可再現(xiàn)性及可追溯性。



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